【关于实验设计的思考】实验设计的基本原则

关于实验设计的思考 (1)保证分配到各组中小鼠的气血阴阳均衡 在本次实验中治疗三组(芪归1:5)组的小鼠死亡数量过半,可能与小鼠本身体质有关。因需要的实验小鼠数量较大,在挑选小鼠时为保证小鼠体重接近,无法只从同一笼中选取小鼠。使得随机分组后各组中产生个体差异。改进的方案可以尽量寻找同一批次的小鼠中体重接近的小鼠,也可以以首次四诊检测的结果为指导,对动物进行科学的分组,使得组间的气血阴阳区别尽量降到最小。

(2)提升实验操作技术 一是造模组第一次造模时对乙酰苯肼溶水后溶液的温度偏低会有晶体析出的现象不甚了解,造成造模时间延长,各个小鼠间被造模的时间也有差异就有可能导致小鼠后期的差异。二是小鼠眼眶取血后并没有及时移入EP管静置而产生溶血反应,造成血清抗氧化能力各组之间无显著差异,与血红蛋白浓度的实验结果不符。三是制作血液及骨髓涂片室因操作不当及实验用具不够快速及时,导致数据的不稳定性。可能的话尽量提供充足的实验用具,使每个组员都能及时参与实验中。还有多加强预实验中操作技术,在正式实验中各个组员分工明确保证环节顺利进行。

(3)乙酰苯肼造模方案 从小鼠血红蛋白含量看正常组与模型组、治疗一组、治疗二组存在显著差异,但模型组与治疗各组之间无显著差异。第1、5天皮下注射2%乙酰苯肼溶液0.05ml/10g,第一次和第二次造模时间相隔比较 久。且乙酰苯肼造模血虚小鼠无法产生长久的血虚造模效果,小鼠在后期可能因自己体质情况而有所恢复,在第二次收集四诊信息时本组有小鼠更为凶猛,抓力并未降低的直观感受。这样就不能很好的反应出治疗组的效果了。建议在造模的设计时,可以采取增加注射的次数,保持APH的效果等方法,以此证明治疗组的疗效。

(4)增加检测观察讨论 在观察脾脏病理切片时,因显微镜的差异和观察者的主观感受不同导致观察结果的差异。而血液及骨髓部分涂片制作不佳,无法很好地在镜下显示。观察涂片往往带有个人主观判断,忽略一些细微的差别,无法保证得到客观准确的结果。可以多个人在多个显微镜下观察同一张病理切片或血液及骨髓涂片,成员互相讨论寻求共识来减少监测观察上的误差。